雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）使用方法

雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）使用方法：

測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

10X Taq Buffer with KCl and 15 mM MgCl2

Dilution Buffer for Restriction Enzymes

10X Buffer Eco52I

10X Buffer SduI, Ppu21I

10X Buffer SdaI

10X Buffer Eam1105I

10X Buffer Ecl136II, PacI, SacI

10X Buffer AarI, AjiI, Bpu10I, ScaI, PasI

10X Buffer TaqI

10X Buffer KpnI

Buffer Set for Restriction Enzymes

10X Buffer BseXI

10X Taq Buffer with (NH4)2SO4

10X Taq Buffer with (NH4)2SO4 and 20 mM MgCl2

10X Taq Buffer with KCl

10X Reaction Buffer with MgCl2 for DNase I

50X TAE Buffer (Tris-acetate-EDTA)

10X TBE Buffer (Tris-borate-EDTA)

10X Taq Buffer without Detergent

10X Buffer BamHI, Lsp1109I

10X Buffer BfuI

10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase

10X DreamTaq™ Buffer

10X T4 DNA Ligase Buffer

10X DreamTaq™ Green Buffer

10X Buffer B

10X Buffer G